Aug 27, 2008

about luciferase assay

Dear all:
小女子深受luciferase assay的internal control困擾
所以上網找其他人有沒有這類的東西
看到了一個網址
http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/11321.html
可是這個人的問題是他的internal control會降低
跟我的不太一樣
後面有個人(doles)有建議 可以試試看phRL vector
是個合成的RL, 據說比較不會受到non specific的activator 影響

而且我剛剛又去看了一下珮雯學姊的論文
他用的就是Promega的phRL-TK
是因為這個原因所以他做起來才不會受影響嗎?

請老闆大人提示~~~~
謝謝

3 comments:

  1. That's interesting!
    I thought the difference between phRL-TK and pRL-TK is the renilla protein, not the promoter regions that TF touches!

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  2. 我剛剛check了一下
    phRL-TK比pRL-TK好一點的地方是
    1.modified sequence of RL would express more in mammalian cells
    2.mammalian transcription factor binding sites on RL were largely removed

    老闆大人說得沒錯ㄚ~感恩~
    p.s 所以我要跟珮雯學姊要一點phRL-TK嗎?

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  3. 嗯 麻煩妳了
    我這就寫給email和美如老師告知一下
    Take both phRL-TK and pGL3-BHLFp.

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